|
Notes:
|
Curs 2013-2014
Un
dels
organismes
model
més
utilitzats
en
experimentació
genètica
és
la
Drosophila
melanogaster
ja
que
la
facilitat
de
manipulació
genètica
i
la
seva
simplicitat
permeten
estudiar
processos
biològics
amb
múltiples
aplicabilitats
en
diferents
àmbits
d’estudi
com
el
desenvolupament
embrionari
i
la
morfogènesis.
La
morfogènesi
es
un
dels
esdeveniments
més
importants
durant
el
desenvolupament
embrionari
que
permet
la
formació
dels
diferent
teixits
i
òrgans,
i
que
depèn
de
l'expressió
genètica
i
de
l'activació
i
coordinació
de
diferents
vies
de
senyalització.
Entendre
com
es
coordinen
aquest
processos
es
fonamental
per
conèixer
com
es
forma
un
òrgan.
Així,
l’objectiu
principal
d’aquest
Treball
de
Final
de
Grau
és
identificar
nous
gens
implicats
en
la
formació
del
sistema
traqueal
(el
nostre
òrgan
model)
mitjançant
un
mini-‐cribratge
funcional
de
gens
que
s’expressen
en
la
tràquea,
a
més
de
generar
eines
per
a
l'estudi
de
la
via
de
senyalització
FGF/Bnl
durant
la
remodelació
del
sistema
traqueal
mitjançant
la
tècnica
de
knock
in.
Per
a
dur-‐ho
a
terme,
amb
el
suport
de
la
base
de
dades
de
Gens
i
Genomes
de
Drosophila
melanogaster
(mod-‐ENCODE
Tissue
Expression
Data)
s’han
seleccionat
gens
candidats
expressats
a
la
tràquea
en
estat
larvari.
Un
cop
identificats,
s'ha
estudiat
la
seva
possible
funció
en
el
desenvolupament
de
les
tràquees
mitjançant
el
seu
silenciament
amb
el
sistema
UAS-‐Gal4.
Així
hem
vist
que
Vein
(CG10491),
CG17098,
No
Ocelli
(CG4491)
i
Peptidasa
(CG4017)
presenten
diversos
fenotips
que
afecten
la
formació
dels
traqueoblasts.
També
hem
vist
que
Vein,
lligand
de
la
via
EGF
és
necessari
per
a
la
proliferació
i
supervivència
de
les
cèl·∙lules
traqueals
del
sac
aeri.
Finalment
s’ha
iniciat
la
generació
d'un
knock
in
en
el
gen
branchless
(bnl).
Per
aquest
motiu
s'han
amplificat
les
regions
5’
i
3’
de
l’exó
2
del
gen
Bnl
i
s'ha
iniciat
la
seva
clonació
dirigida
al
vector
de
destí
pTV-‐Cherry.
Aquesta
tècnica
generarà
eines
que
permetran
entendre
la
funció
del
gen
bnl
durant
la
remodelació
del
sistema
traqueal.
One
of
the
most
widely-‐used
model
organisms
for
genetic
studies
is
Drosophila
melanogaster,
as
it
is
easy
to
genetically
manipulate
and
its
simplicity
allows
for
the
study
of
biological
processes
with
multiple
applicabilitys
such
as
the
study
of
embrionary
development
and
morphogenesis.
Morphogenesis
is
one
of
the
most
important
events
during
embryogenesis
that
controls
organ
and
tissue
formation.
Such
complicated
process
depends
on
genetic
regulation
and
on
the
activation
and
coordination
of
several
signaling
pathways.
Therefore,
it
is
crucial
to
know
the
regulation
of
those
processes
in
order
to
understand
how
an
organ
is
formed.
Thus,
the
main
goal
of
this
Final
Degree
Project
is
to
identificaty
new
candidate
genes
participating
in
tracheal
system
development
(our
organ
model)
by
a
functional
mini-‐screen
of
genes
highly
expressed
in
the
trachea.
Moreover,
we
generated
tools
in
order
to
study
FGF/Bnl
signaling
pathway
during
tracheal
system
remodeling.
Using
the
Drosophila
melanogaster’s
Genes
and
Genomes
database
(mod-‐ENCODE
Tissue
Expression
Data)
several
candidate
genes
expressed
in
the
trachea
during
larval
stage
have
been
selected.
We
investigate
the
possible
functions
of
these
candidate
genes
by
silencing
them
specifically
in
the
tracheal
system.
We
have
found
that
CG17098,
No
Ocelli
(CG4491)
and
Peptidase
(CG4017)
genes
present
aberrant
phenotypes
in
tracheoblasts
formation.
In
addition,
we
found
that
vein,
a
ligand
of
EGF
signaling
promote
cell
proliferation
and
cell
survival
in
tracheal
cells
of
the
air
sac
primordium.
Finally
we
have
started
the
generation
of
a
knock
in
in
Bnl
locus.
To
this
end
we
amplified
5’
and
3’
regions
flanking
exon
2
of
Bnl
gene
and
cloned
those
fragments
to
the
destination
pTV-‐Cherry
vector.
This
technique
will
allow
us
to
generate
tools
to
study
the
role
of
bnl
during
tracheal
system
remodeling. |
